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李錚主任醫(yī)師 上海市第一人民醫(yī)院（北部） 男科 原創(chuàng)?陳威李朋白昊威?前言2022年2月6日，上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院李錚和吳煜/張箴波團(tuán)隊在著名男性生殖雜志“AsianJournalofAndrology“”在線發(fā)表題為“ClinicalbenefitsofamodifiedCryopiecesystemforcryopreservationofrareejaculatedandtesticularspermatoz-oaforICSI（改良超薄片凍融稀少精液或睪丸精子的臨床獲益）”的文章。這是自2016年成功孕育國內(nèi)第一例通過單精子冷凍技術(shù)誕生的試管嬰兒，結(jié)合團(tuán)隊多年臨床治療經(jīng)驗，總結(jié)和優(yōu)化單精子冷凍系統(tǒng)后，系統(tǒng)分析和報道優(yōu)化單精子冷凍系統(tǒng)所出生12名單精子冷凍試管寶寶的故事。這對于上海市第一人民醫(yī)院男科和輔助生殖科來說又一個跨越性的進(jìn)步，進(jìn)一步證實單精子冷凍技術(shù)是解決極少量精子患者生育問題非常有效且安全的核心技術(shù)手段。李錚與吳煜/張箴波團(tuán)隊就此與讀者分享，以期為更多嚴(yán)重男性不育患者獲益，共同推動男性生育力保存的臨床應(yīng)用。01??文章基本概述稀少與單精子冷凍系統(tǒng)（modifiedCryopiecesystemforcryopreservationofrareejaculatedandtesticularspermatozoa）上海市第一人民醫(yī)院泌尿外科臨床醫(yī)學(xué)中心男科主任李錚教授介紹，無精子癥是男性不育的疑難重癥，約占男性總?cè)丝诘?%，占男性不育人口10%-15%，推算我國無精子癥患病人數(shù)已達(dá)到500萬-600萬左右。如此人數(shù)眾多的患者群體，在過去，由于缺乏有效的治療方法，患者幾乎無法生育自己的生物學(xué)子代。而如今，可以通過藥物新輔助治療出現(xiàn)精子、或通過顯微取精技術(shù)取到精子，繼而實施輔助生殖技術(shù)成功生育子代。通過藥物治療或者睪丸手術(shù)取精獲得的極少量的精子，如何將其受精和發(fā)育功能完整的保存下來，目前是男性生育力保存的一個亟需解決的難題。文章介紹的單精子冷凍系統(tǒng)，為解決這個難題，提供了一個全新的解決思路并在臨床應(yīng)用中進(jìn)一步的驗證了臨床應(yīng)用的可行性及安全性。所謂單精子冷凍技術(shù)，是指將嚴(yán)重少精子癥或無精子癥男性患者，經(jīng)過治療或手術(shù)后取得的極少量的精子逐個挑選出來，加載在特殊的載體上，放入-196℃液氮進(jìn)行保存的技術(shù)（發(fā)明專利號：ZL201610396509.1）。通過新載體Cropiece(專利號：ZL201620544372.5)實施此項技術(shù)，以成功實現(xiàn)患者夫婦擁有健康寶寶的夢想。首先通過直接洗滌或者梯度離心等方法，將精液中或者分離于生精小管中的極少量的精子分離和濃縮在少量液體中。然后將這少量的標(biāo)本在特制的平板中平鋪開，讓精子獲得運動能力，游動起來。技術(shù)人員在顯微鏡下，通過顯微鏡放大作用將液體中極少量的精子找出（通常情況下0-30條精子），同時判斷精子的活力、形態(tài)。然后通過顯微注射針（直徑5-7μm）抓取后，放置于Cryo-piece片（冷凍載體）上的特制的冷凍保護(hù)劑的冷凍液滴中（1-2μl）。在規(guī)定的時間內(nèi)，將帶有抓取好精子的冷凍載體，按照特定的冷凍程序進(jìn)行降溫，最后冷凍在-196℃液氮中。通過改良單精子冷凍系統(tǒng)，可以將極少量的精子，通過“單個抓取小室”冷凍的方法保存起來，可以極大程度上避免傳統(tǒng)冷凍方法冷凍極少量精子過程中精子丟失和精子活力丟失的問題。從文章中獲悉，從2016年第一例單精子冷凍試管嬰兒出生，到2019年又有12名單精子冷凍試管寶寶陸續(xù)出生。后續(xù)還有近百位患者進(jìn)行進(jìn)一步ICSI治療，目前復(fù)蘇后精子回收率能夠穩(wěn)定在80%，存活率近30%，這對于嚴(yán)重男性不育者而言，這是臨床創(chuàng)新技術(shù)，是生育自己子代的福音。同時文章報道，該技術(shù)運用到睪丸顯微取精手術(shù)中獲得同樣的效果，雖然精子的復(fù)蘇率不如手淫獲取的精液精子，但是受精率、懷孕率和出生率均與手淫獲取的精子沒有差異。進(jìn)一步證實，單精子冷凍技術(shù)同樣適用于冷凍睪丸手術(shù)取精患者的極少量精子的冷凍，并且能夠獲得同樣的成功率。文章進(jìn)一步報道：對于一些獲得極少量精子但是復(fù)蘇后沒有活力的病例，也進(jìn)行相應(yīng)處理。在征得患者的同意并簽署知情同意書的情況下，通過卵母細(xì)胞輔助激活的方法來解決單精子冷凍過程中，復(fù)蘇后精子的受精低下問題。文章中提到，通過卵子激活后的單精子冷凍系統(tǒng)的復(fù)蘇精子的受精率有大幅的提高。但是輔助激活組的的流產(chǎn)率也有所提升。同時文章中也提到，對于復(fù)蘇后無活力精子進(jìn)行卵母細(xì)胞的輔助激活，雖然在受精率上有所提升，但是如何進(jìn)一步提高妊娠率，需要加大樣本量深入研究。目前極稀少精子的單精子冷凍系統(tǒng)，在上海市第一人民醫(yī)院李錚和吳煜/張箴波團(tuán)隊的指導(dǎo)下，經(jīng)過進(jìn)一步研究、完善和改良后取得了更好的臨床效果。目前已采用此法已經(jīng)為國內(nèi)外近百名患者進(jìn)行了單精子冷凍，該類患者通過冷凍好的這些極少量的精子獲得了進(jìn)行輔助生殖技術(shù)得到生育自己孩子的機(jī)會。除了文章中提到的12名出生的單精子寶寶出生，還有一批懷孕中的單精子寶寶，中心會一直關(guān)注這些孩子的健康成長，期待更多患者的好消息。男性生育力保存任重而道遠(yuǎn)，我們一起上下求索。愿天下家庭俱歡顏！02??研究團(tuán)隊【第一作者介紹】上海市交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院輔助生殖醫(yī)學(xué)科。研究方向主要關(guān)注人類配子、卵巢及睪丸組織相關(guān)的生育力保存研究。DPV單精子冷凍和umSSC超微量單精子冷凍技術(shù)發(fā)明者，并成功出生國內(nèi)第一例單精子冷凍技術(shù)試管嬰兒。目前以第一或通訊作者發(fā)表SCI論文6篇，獲得國家發(fā)明專利1項，實用新型專利1項。上海市交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院男科博士后，中國婦幼保健協(xié)會輔助生殖技術(shù)監(jiān)測與評估專業(yè)委員會精子庫與生殖男科學(xué)組委員兼秘書，中華預(yù)防醫(yī)學(xué)會生育力保護(hù)青委會委員，吳階平醫(yī)學(xué)基金會生殖青年專委會委員，湖南省免疫學(xué)會生殖免疫分會青年委員，湖南省醫(yī)學(xué)會生殖醫(yī)學(xué)專委會生殖男科學(xué)組委員，湖南省醫(yī)學(xué)會男科學(xué)專業(yè)委員會男性不育與生殖學(xué)組秘書。研究方向：男性生育力保存，目前主持國家級課題2項。以第一作者發(fā)表SCI論文16篇，以第一完成人獲得專利7項?！就ㄓ嵶髡呓榻B】上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院主任醫(yī)師、教授、博導(dǎo)，泌尿中心副主任、男科主任、輔助生殖科副主任。先后作為高級訪問學(xué)者留學(xué)美國、加拿大與與香港地區(qū)?，F(xiàn)任中國醫(yī)師協(xié)會男科與性醫(yī)學(xué)分會常委兼總干事，上海醫(yī)學(xué)會男科學(xué)分會前任主任委員，中國醫(yī)師協(xié)會生殖醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會常委兼男科學(xué)副組長，亞洲男科學(xué)協(xié)會常委兼秘書長，上海醫(yī)師協(xié)會生殖醫(yī)師分會副會長，國家衛(wèi)健委輔助生殖技術(shù)評審專家。擔(dān)任國內(nèi)外男性生殖領(lǐng)域重要期刊10本雜志編委或特邀編輯。聚焦精子發(fā)生機(jī)制與干細(xì)胞向精子誘導(dǎo)分化，國際上首次實現(xiàn)從患者睪丸中獲取精原干細(xì)胞，體外誘導(dǎo)分化為精子細(xì)胞，并具有受精潛能。國際上首次證明單精子凍融可安全用于臨床，并出生健康子代。目前承擔(dān)國家重大課題子課題一項；自然基金面上項目二項。作為第一完成人，榮獲教育部科技進(jìn)步二等獎，上海醫(yī)學(xué)科技一等獎，亞洲男科學(xué)協(xié)會“杰出學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)獎”，上海醫(yī)學(xué)會“領(lǐng)軍人物獎”，上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院“卓越教師獎”。上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科，主任醫(yī)師。上海醫(yī)學(xué)會生殖醫(yī)學(xué)專科分會副主任委員。上海市中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會第二屆生殖醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會副主任委員。中國女醫(yī)師學(xué)會生殖醫(yī)學(xué)專業(yè)會常委。上海醫(yī)師協(xié)會生殖生殖醫(yī)學(xué)醫(yī)師分會委員。研究專業(yè)方向：不孕不育，輔助生殖技術(shù)。2022年05月07日
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